BACILLUS THURINGEIENSIS BAKTERIYASINING QISHLOQ XO’JALIGIDAGI NAZARIY VA AMALIY AHAMIYATI

Аннотация

Ushbu tezisda Bacillus thuringiensis (Bt) bakteriyasining insektidsit xususiyatlari va qishloq xo’jaligidagi ahamiyatlari ko’rilib chiqiladi.Ya’ni Bacillus thuringiensis (Bt) ning Kattta mum kuya (GWM) Galleria mellonella (Lepidoptera: Pyralidae) asalari uyalariga jiddiy zarar yetkazadigan asosiy zararkunandaga qarshi kurashishda ishlatilishi yoritilgan. Kalit so’zlar: Bacillus thuringeiensis, Cry va Cyt - toksin,insektidsit,ekologik xavfsizlik, , d-endotoksinlar,GWM Kirish: Bacillus thuringiensis (Bt) tuproq bakteriyasi boʻlib, oʻsish siklining statsionar bosqichida spora hosil qiladi. Sporlar kristallarni o'z ichiga oladi, ular asosan bir yoki bir nechta Cry va yoki Cyt oqsillarini (shuningdek, d- endotoksinlar deb ham ataladi) kuchli va o'ziga xos insektitsid faolligiga ega. Bt ning turli shtammlari har xil turdagi toksinlarni hosil qiladi, ularning har biri hasharotlarning tor taksonomik guruhiga ta'sir qiladi. Shuning uchun Bt toksinlari ekinlarni himoya qilish uchun topikal pestitsidlar sifatida ishlatilgan va yaqinda oqsillar zararkunandalarga xos qarshilik ko'rsatish uchun transgen o'simliklarda ifodalangan. Bt transgen ekinlari juda muvaffaqiyatli va foydali bo'lib, yuqori hosildorlikka olib keldi . Cry toksinlari hasharotlarning o'rta ichak oqsillarini bog'laydi, bu esa hasharotlar hujayralarini o'ldiradigan membrana ichiga kirib boradigan teshikdan oldingi oligomerning shakllanishiga yordam beradi. Asosiy qism: Katta mum kuya (GWM), Galleria mellonella (Lepidoptera: Pyralidae) asalari uyasiga katta zarar etkazuvchi va iqtisodiy yo'qotishlarga olib www.tadqiqotlar.uz 19-to’plam 3-son May 2025 231 Ta'limning zamonaviy transformatsiyasi keladigan asosiy ari zararkunandasi hisoblanadi. Bacillus thuringiensis (Bt) bu zararkunandaga qarshi kurashish uchun potentsial barqaror yechim sifatida namoyon bo'ladi. Bu yerda LC50 qiymati 2 mkg/g dan past bo‘lgan GWM lichinkalariga qarshi insektitsid faolligini va asal ari uchun past toksiklik darajasini ko‘rsatadigan yangi Bt shtammini (BiotGm deb nomlanadi) ishlab chiqilgan va lichinkalar uchun LC50 = 20598,78 mkg/mL va kattalar uchun nojo‘ya ta’sirLC50 = 1 mkg/mkg . GWM lichinkalari uchun joziba, BiotGm va asalarilarning joziba bilan aloqa qilishiga yo'l qo'ymaydigan tutqichdan iborat tuzoqqa tushirish usulini ishlab chiqilgan. Bu usul laboratoriya va dala sinovlarida GWM lichinkalari populyatsiyasini kamaytirishini aniqlagan. GWM lichinkalariga qarshi Bioassay dietasi Bt preparati ishlab chiqilgan. Optimal bioassay dietasi GWM lichinkalarining an'anaviy sun'iy dietasi va Spodoptera frugiperda sun'iy parhez formulasiga asoslangan edi. Bioassay dietasi 10 g xamirturush ekstrakti kukuni, 25 g sut kukuni, 50 g bug'doy uni, 50 g makkajo'xori kukuni, 50 g bug'doydan iborat edi. Afzal bioassay usuli S. frugiperda va H. armigera usullariga murojaat qilib tuzilgan. Beshta Bt mahsuloti ddH2O da eritildi va turli konsentratsiyali gradientlarning suspenziyalarigacha suyultirildi. Keyin yuqoridagi suyultirilgan suspenziyadan 2 ml 10 g bioassay dietasiga qo'shiladi va teng ravishda aralashtiriladi. Dastlabki tajribalar asosida LC50 ni aniqlash uchun quyidagi konsentratsiyalar ishlab chiqilgan: GO33A: 0.5,1,2,4 va 8 mkg/g; G033A- 0.5,1,2,4 va32 mkg/g; KN11:0.5,1,2,4 va 8 mkg/g; KN11-1 16 mkg/g; va BiotGm: 0,5, 1, 2, 4 va 8 mkg/g. Aralashtirilgan parhez ortiqcha suvni bug'lantirish uchun xona haroratida 3 soat davomida saqlanadi. Bioassay dietasi 12 quduqli steril hujayra madaniyati plastinkasiga teng ravishda bo'lingan va qoshiq yordamida teshikning pastki qismining bir tomoniga bosilgan. Mustahkam 2- bosqich lichinkalari quduqlarga bittadan lichinka bilan emlangan. Plitalar 30 ± 1 ° C, 60 ± 5% RH va qorong'ilikda inkubatorga joylashtirildi. Bundan tashqari, ddH2O (2 ml) 10 g dietaga nazorat sifatida qo'shildi. Har bir davolashda 4 ta takroriy va 12 ta lichinka mavjud edi. O'lik va tirik lichinkalar soni har kuni vizual tekshirish orqali tekshirildi. Bt bilan kasallangan o'lik lichinkalar qora rangga ega. www.tadqiqotlar.uz 19-to’plam 3-son May 2025 232 Ta'limning zamonaviy transformatsiyasi 120 soatlik o'lim ma'lumotlari Abbott formulasi 64 orqali nazoratdagi tabiiy o'limdan foydalangan holda tuzatildi. 120 soat uchun LC50 qiymati avval tavsiflangan protsedura65 yordamida hisoblab chiqilgan. BiotGm dan BiotGm genomik DNKsi uchun genomik DNKni tayyorlash, ketma-ketlik va hisoblash tahlili xabar qilingan protsedura yordamida tayyorlangan66. BiotGm genomi Pacific Biosciences RS II (Pacific Biosciences, Menlo Park, CA, AQSH) sekvensiyalash platformasi yordamida ketma-ketlashtirildi. Sekvensiya chuqurligi ~ 200 barobar qamrovni tashkil etdi. PacBio o'qishlarini yangi yig'ish SMRT portaliga kiritilgan RS_HGAP_Assembly.3 protokoli yordamida amalga oshirildi. Genom annotatsiyasi NCBI prokaryotik genom avtomatik izohlash quvur liniyasi tomonidan amalga oshirildi. Tarkibi vektor daraxti (CVTree) filogenetik tahlili bepul, veb-asoslangan vosita - Bacillus Typing Bioinformatics Datab