Генетические и метаболические нарушения в патогенезе витилиго и разработка методов их коррекции

Аннотация

Актуальность и востребованность темы диссертации. Во всем мире основные усилия ученых и специалистов-дерматологов направлены на выяснение механизма возникновения и развития витилиго и разработку эффективных методов его лечения. Витилиго представляет собой заболевание, связанное с нарушением пигментации кожи, характсризирующийся резким уменьшением или отсутствием мслоноцитов, синтезирующих пигмент меланин в коже больных и появлением четко ограниченных пятен белого или молочно-белого цвета, разнообразных по форме, размерам, количеству и локализации. Наблюдаемый в последние годы интенсивный рост заболеваемости витилиго среди детей, молодёжи, лиц трудоспособного возраста, а также значительное снижение качества жизни больных придает этому дерматозу определенное социальное значение. Несмотря на это все ещё остается не ясным этиопатогенез витилиго и эффективные методы его лечения. Следовательно, решение этих проблем представляется чрезвычайно важным и необходимым. В мировой практике дерматокосметологические заболевания, в том числе, витилиго представляя собой выраженный косметический недостаток, часто приводят к психоэмоцианальному дискомфорту, снижающему качество жизни, а также вызывает медико-социальные и экономические проблемы. Витилиго является мультифакториальным заболеванием, этиопатогенез которого остается окончательно не изученным, а диагностика и патогенетические обоснованные методы лечения все еще отсутствуют, что в целом, определяет актуальность проблемы. Вместе с тем, изучение в коже оксидативного стресса, нарушение фосфолипидного состава, изменение количественного содержания микроэлементов приводящих к программированной гибели (апоптоз) меланоцитов при развитии витилиго, а также определение полиморфизма маркерных генов и разработка эффективных методов диагностики и лечения заболевания остается также перспективным направлением научно-исследовательской деятельности. В стране осуществляется широкомасштабная работа по радикальной реформе системы здравоохранения. Решение данной проблемы тесно связано с пятью приоритетными направлениями развития Республики Узбекистан на 2017-2021 годы, направленных на «снижение уровня заболеваемости и смертности среди населения»1. В этой связи особенно важно повысить уровень медицинской помощи населению, расширить использование инновационных технологий, направленных на разработку новых методов диагностики и лечения кожных и венерических заболеваний, в том числе различных форм витилиго. Данное диссертационное исследование в определенной степени служит выполнению задач, предусмотренных в Указе Президента Республики Узбекистан № УП-4947 «О стратегии действий по пяти приоритетеным направлениям развития Республики Узбекистан в 2017-2021 годы » от 7 февраля 2017 года и в Постановлении Республики Узбекистан № ПП-3071, «О мерах по дальнейшему развитию специализированной медицинской помощи населению Республики Узбекистан» от 20 июня 2017 года, а также в других нормативно-правовых документах принятых в данной сфере. Целью исследования является определение роли генетических и метаболических нарушений в механизме развития витилиго и на основе полученных результатов разработка нового метода его патогенетической терапии. Научная новизна диссертационного исследования заключается в следующем: впервые доказана ассоциация полиморфизма 308 G/А гена TNF-a с риском развития витилиго; определены частоты распределения аллелей и генотипов полиморфизма G/A (rs 1393350) гена TYR у здоровых лиц и больных витилиго. Выявлена связь этого полиморфизма с предрасположенностью человека к развитию витилиго; впервые установлено нарушение качественного и количественного составов фосфолипидов, в сыворотке и коже человека, в норме и при витилиго, который привело к стимуляции процесса апоптоза меланоцитов; установлен высокий уровень окислительного стресса в коже и сыворотке крови больных витилиго, что привело к токсическому разрушению мембран меланоцитов; доказано изменение количественного содержания микроэлементнов в коже и волос человека у больных витилиго, в частности снижение содержание меди вызывая подавление активности фермента тирозиназы тормозил синтез меланина; разработан, многокомпонентный препарат «Липовитилин» в форме спрея направленный для патогенетического лечения витилиго. Заключение 1. Впервые доказана однозначная ассоциация полиморфизма (rs 1800629) 308G/A гена TNF-a с риском развития витилиго и установлен вклад изменений частот распределения аллсля-А и генотипов G/А, А/А этого полиморфизма в патогенез заболевания. При этом частота выявления неблагоприятного аллеля А этого полиморфизма была значительно выше у больных витилиго по сравнению с контролем - 23,7% и 10,8%, соответственно (у2 =9,23; р=0,002; OR=2,56; 95% CI 1,38-4,75). Из 93 больных у 36 встречался неблагоприятный гетерозиготный генотип G/A, что составляет 38,7%, а в контрольной группе 21,6% (OR=2,29; р=0,007; у2-9,88; 95% С1-1,14-4,58). Частота встречаемости мутантного генотипа А/А полиморфизма гена TNF-a в общей группе больных витилиго составляла 4,3%, т.е. среди 93 больных в 4 случаях выявлен данный генотип, что в контрольной группе не был обнаружен. 2. Впервые в Узбекистане определены частоты встречаемости аллелей и генотипов полиморфизма G/A (rs 1293350) гена TYR у здоровых лиц и больных витилиго. Выявлено присутствие аллеля А и генотипа А/А в полиморфизме (rs 1393350) гена TYR. Установлена связь этого полиморфизма с риском развития витилиго. Из 58 больных витилиго у 23 обнаружены неблагоприятные генотипы G/А, что составляет 39,7%, а в контрольной группе 30% (OR=1,53; 95% CI -0,65-3,61)болсе чем в 1,35 раза выше по сравнению с контрольной группой. При этом частота встречаемости неблагоприятного, мутантного аллеля А полиморфизма гена TYR была значительно больше в группе больных витилиго, чем среди лиц контрольной группы-26,7% и 20,0%, соответственно. Установлено наличие в достаточно высоком уровне мутантного гомозиготного генотипа А/А, содержание которого составляет 6,9%, а в контрольной rpynne-5,0%(OR=l,41; 95% CI -0,25-8,08), что свидетельствует в предрасположенность к развитию витилиго и его носительство повышает риск развития данного заболевания почти в 1,5 раза (OR= 1,41). 3. Впервые, в отличие от нормы, в коже больных витилиго выявлены значительные сдвиги в содержании отдельных фракций фосфогликолипидов. На фоне снижения нейтральных фракций фосфолипидов отмечается достоверное увеличение кислых фракций фосфолипидов. У больных витилиго в пораженном участке кожи концентрация цереброзидов уменьшается на 13,6%, а в непораженной части на 7% по сравнению с нормой. 4. У больных витилиго, в коже, так и в сыворотке крови отмечалось достоверное увеличение малонового диальдегида, и достоверное снижение уровня каталазы, которые завесили от сроков давности заболевания и они были более выражены в непораженных участках кожи по сравнению с пораженными очагами. Выявленные нарушение свидетельствуют об участие окислительного стресса в патогенезе развития витилиго. 5. Установлено достоверное снижение содержания йода (I) и меди (Си) в коже, достоверное снижение содержания йода (I), меди (Си), цинка (Zn), кобальта (Со) и золота (Au) в волосах у больных витилиго, которые имеют немаловажную роль в процессе меланогенеза. 6. Разработан комплексный метод терапии больных витилиго, заключающийся в назначении, на фоне стандартной терапии, многокомпонентного липосомного препарата «Липовитилин», который способствовал повышению эффективности лечения, нормализации митотического индекса, пролиферации меланоцитов в коже и подавлению интенсивности окислительного стресса, как в коже, так и в сыворотке крови по сравнению со стандартной терапией. 7. Уровень выявляемое™ генотипов и аллелей полиморфизмов маркерных генов (TNF-a, TYR), усиление интенсивности окислительного стресса, нарушение состава фосфолипидов, а также изменение содержания микроэлементов в коже больных в совокупности является основным механизмом патогенеза витилиго.