Характеристика действия полифенолов (рутана, госситана) и алкалоида (дезоксипеганина) на транспорт Са2+ в синаптосомах мозга крыс

Аннотация

Актуальность и востребованность темы диссертации. В настоящее время во всем мире отмечается неуклонный рост числа социально значимых нейродегенеративных заболеваний вследствие нарушения кальциевого гомеостаза нервных клеток1,2. Биологически активные соединения являются перспективными источниками при создании эффективных нейропротекторных препаратов для лечения нейродегенеративных заболеваний, а также заболеваний центральной/периферической нервной системы, повреждающиеся при патогенезе токсикологической и наркологической интоксикаций. На сегодняшний день во всем мире в научных исследованиях, проведенных в этом направлении выявлено, что нейродегенеративные заболевания вызваны дисфункцией ионно-транспортных систем и рецепторных комплексов, которые представляют функциональную активность клеток симпатической/парасимпатической нервной системы мозга. Са2’ является центральным компонентом в процессах передачи сигналов и возбудимости/регенерации в нервных клетках, особенно в синаптосомах мозга [Са2+],п, что приводит к серьезным патологическим состояниям. С этой точки зрения изучение механизмов фармакологической коррекции Са2+ - транспорта биологически активных веществ в синаптосомах в патологических состояниях имеет актуальное научно-практическое значение. В настоящее время в нашей стране проведены масштабные реформы по улучшению материально-технической базы диагностики и лечения заболеваний нервной системы, обеспеченности фармацевтическими препаратами. В области профилактики и лечения нейродегенеративных заболеваний достигнуты определенные результаты в части производства эффективных нейропротекторных препаратов на основе местного сырья. Необходимо отметить, что, разработкам современных методов диагностики заболеваний, в основе которых лежит нарушение Са2+- гомеостаза, нейродегенеративных заболеваний, патологий связанных с изменением нервных клеток, при токсикологических и наркологических интоксикациях, уделено недостаточное внимание. Внедрение комплексных мер в этом направлении послужит ориентиром для дальнейшего развития фармацевтической промышленности, а также для улучшения предоставления доступных и высококачественных лекарств населению и поставщикам медицинских услуг, перечисленных в Стратегии действий для дальнейшего развития Республики Узбекистан. В этом отношении, играет важную роль создание нейропротекторных препаратов, на основе местного сырья, конкурентоспособных на мировом рынке. Данное диссертационное исследование в определенной степени служит выполнению задач, предусмотренных в Постановлении Президента Республики Узбекистан от 28 ноября 2011г № ПП-1652 «О мерах по дальнейшему углублению реформирования системы здравоохранения», Указе Президента Республики Узбекистан от 7 февраля 2017 г № УП-4947 «О стратегии действий по дальнейшему развитию Республики Узбекистан», а также в других нормативно-правовых документах, принятых в данной сфере. Целью исследования является характеристика механизма действия ругана, госситана и дезоксипеганина в условиях in vitro на транспорт Са2+ в синаптосомах головного мозга крыс, а также обоснование их нейропротекторных свойств. Научная новизна диссертационного исследования состоит в следующем: выявлено с помощью Са2+- чувствительного зонда - хлортетрациклина повышение проницаемости пресинаптической мембраны при низких концентрациях глутамата, а также возрастание концентрации [Са2+],„ в синаптосомах мозга крыс; обосновано протекторное действие рутана в условиях хронической алкогольной интоксикации на динамику [Са2+],„ в нервных клетках; установлена конкуренция между госситаном и нифедипином за счет регулирования дигидропиридин-чувствительных кальциевых каналов; выявлено антитоксическое действие алкалоида дезоксипеганина подобно глутамату в условиях хронической алкогольной интоксикации путем модуляции активности NMDA-рецепторов; доказано действие дезоксипеганина на выход Са2+ из внутреннего депо тромбоцитов, обусловленное снижением активности [Са2+]/л, а также релаксантное действие на гладкомышечные клетки за счет блокирования Са2\-канала. Выводы 1. Установлено, что в контрольной группе глутамат (10-100 мкМ) увеличивает интенсивность флуоресценции в суспензии синаптосомах головного мозга крыс и уровень Са2+-проницаемости пресинаптической мембрана, следовательно и концентрацию [Са2+],„. 2. Выявлено, что хроническая алкогольная интоксикация способствует повышению активности ГАМК- и NMDA-рецепторов, что в свою очередь, приводит к патологическому изменению концентрации [Са2+],„. 3. Впервые выявлено, что при хронической алкогольной интоксикации руган возможно конкурентно с L-глутаматом, а госситан неконкурентно с L-глутаматом оказывают положительное действие на динамику [Са2+],„ в нервных клетках. 4. Алкалоид дезоксипеганин (10-100 мкМ) аналогично L-глутаматом, в условиях хронической алкогольной интоксикации путем модуляции активности NMDA-рецепторов оказывает антитоксическое действие. 5. Впервые установлено, что антиагрегационное действие алкалоида дезоксипеганина (100 мкМ) в тромбоцитах за счет снижения активности вне и внутриклеточного Са2+-транспорта выражается в снижении концентрации [Са2+],„. Это имеет важное значение в качестве дополнительного подтверждения факта снижения концентрации [Са2+],„ в синаптосомах под действием алкалоида дезоксипеганина. 6. Релаксантное действие дезоксипеганина (10-50 мкМ) в условиях in vitro на активность изометрического сокращения препарата аорты крыс связано с уменьшением концентрации [Са2+]„, за счет блокирования Ca2+i_-канала клеток гладких мышц. Эти данные могут служить дополнительным потдверждением того, что дезоксипеганин уменьшает концентрацию [Са2+],„ в синаптосомах. 7. Обнаружено, что на основании проведенных экспериментов в условиях in vitro, с использованием биологически активных веществ, таких как рутан, госситан и дезоксипеганин можно регулировать патологические изменения в ГАМК- и NMDA-рецепторах при разных состояниях алкогольной интоксикации.