Разработка новых методов диагностики и терапии нерубцовых форм алопеций на основе изучения молекулярно-генетических факторов

Аннотация

Актуальность и востребованность темы диссертации. В современной дерматокосметологии наблюдается тенденция к увеличению числа заболеваемости кожи волосистой части головы, в частности, выпадения волос - нерубцовых форм алопеций. Среди всех заболеваний волос в 80% и выше протекают с гибелью волос. Такая патология всречается 30-40% случаев у лиц до 50 лет. У 5-10% пациентов с мелкоочаговой формой заболевания развивается полная потеря волос на коже головы, а в 1-2% случаев - полное выпадение волос на голове и туловище. В мировой практике среди дерматокосметологических проблем наиболее часто встречаются различные формы алопеций, которые представляя собой выраженный косметический недостаток, часто приводят к психоэмоциональному дискомфорту, снижающему качество жизни, а также заболевание вызывает как социальные проблемы, обусловленные ограничением в выборе профессии, трудоустройстве и социальной перспективы, так и экономические, в связи с длительностью лечения и его высокой стоимостью. Несмотря на многолетнюю историю проблемы нерубцовых форм алопеций, вопросы этиопатогенеза, диагностики и лечения нерубцовой алопеции до сих пор недостаточно изучены. В настоящее время для выявления новых патогенетических механизмов в развитии патологического состояния регенеративной медициной уделяется большое внимание биологически активным регуляторным молекулам - факторам роста, определяющих биоритм волос. В соответствии с изложенным выше, данная научно-исследовательская работа посвящена изучению факторов роста, определяющих биоритм волос, их антагонистам - факторам апоптоза и, безусловно, пути проникновения факторов роста в клетку изучением активности тирозинкиназных рецепторов. В стране осуществляется широкомасштабная работа по радикальной реформе системы здравоохранения. Решение данной проблемы тесно связано с пятью приоритетными направлениями развития Республики Узбекистан на 2017-2021 годы, направленных на «снижение уровня заболеваемости и смертности среди населения». В этой связи особенно важно повысить уровень медицинской помощи населению, расширить использование инновационных технологий, направленных на разработку новых методов диагностики и лечения кожных и венерических заболеваний, в том числе различных форм облысения. Данное диссертационное исследование в определенной степени служит выполнению задач, предусмотренных в Указе Президента Республики Узбекистан № У П-4947 «О Стратегии действий по пяти приоритетным направлениям развития Республики Узбекистан в 2017-2021 годы» от 7 февраля 2017 года и в Постановлении Президента Республики Узбекистан № ПП-3071 «О мерах по дальнейшему развитию специализированной медицинской помощи населению Республики Узбекистан» от 20 июня 2017 года, а также в других нормативно-правовых документах, принятых в данной сфере. Целью исследования является изучение молекулярно-генетических факторов и разработка патогенетически обоснованного метода терапии различных форм нерубцовых алопеций. Научная новизна исследования заключается в следующем: определены концентрации факторов роста и факторов апоптоза, а также полиморфизм генов, регулирующих их в узбекской популяции, при нерубцовых формах алопеций; определены маркеры факторов роста и апоптоза путем установления корреляционных связей с полиморфизмами генов VEGF и TNF-a при нерубцовых алопециях; доказана зависимость цикла волосяного фолликула от экспрессии рецепторов клеточных мембран с тирозинкиназной активностью; впервые определены маркеры межклеточного матрикса (TIMP1) молекул волосяного фолликула при нерубцовых формах алопеций; впервые методом видеотриходерматоскопии разработаны критерии диагностики нерубцовых форм алопеций в узбекской популяции; впервые разработан новый, патогенетически обоснованный и эффективный метод терапии нерубцовой алопеции. Заключение 1. Видеотриходерматоскопическим исследованием волосистой части головы у пациентов нерубцовыми формами алопеций выявлена различная степень атрофичности волосяных фолликулов, зависящее от тяжести и длительности патологического процесса, наличие в патологических очагах «кадаверизированных» и волос в виде «восклицательных знаков» (3,4-76,5%) при гнездной алопеции и увеличением доли телогеновых волос на фототрихограмме (34,1-73,2%)при андрогенной алопеции, что явилось основанием для разработки алгоритма диагностики. 2. Установлено достоверное снижение уровня фактора роста фибробластов bFGF (р<0,001) при нерубцовых алопециях; достоверное увеличение фактора ингибиции цикла волосянного фолликула - апоптоза FasL (р<0,001) при гнездной алопеции, который достоверно снижался по мере увеличения степени тяжести заболевания, а при андрогенной алопеции достоверное увеличение его лишь при более поздних стадиях - IV-V степени у пациентов мужского пола и III степени пациенток женского пола. 3. Выявлено достоверное снижение активности тирозинкиназных рецепторов ERBB (р<0,001) и тканевого ингибитора матриксных металлопротеиназ TIMP1 (р<0,001) у пациентов нерубцовой формой алопецией, коррелирующее со степенью тяжести патологического процесса и констатирующее об определяющем значении соединительной ткани внеклеточного матрикса в цикле волосяного фолликула. 4. Изучение генотипического профиля полиморфизмов эндотелиального фактора роста (G(-634)C и G(-1154)A гена VEGF) у пациентов нерубцовой алопецией указывает на несамостоятельность данных локусов в развитии заболевания. Изучение генотипического профиля полиморфизма фактора некроза опухоли у пациентов нерубцовой алопеции показало высокий уровень показателя прогностической эффективности (AUC=0,63) полиморфизма G-308A гена TNF-a, что связано с увеличением риска возникновения апоптоза и развития нерубцовой алопеции. При этом носительство аллеля А и гетерозиготного генотипа G/А достоверно связано с увеличением риска развития заболевания, аллель G и генотип G/G, напротив, являются протективными маркерами. 5. Установлена патогенетическая взаимосвязь генотипических вариантов VEGF и TNF- а с факторами роста и апоптоза при гнездной алопеции выявлением генобиологических ансамблей между FGF с генотипом САполиморфизма G(-l 154)Агена VEGF (достоверная отрицательная корреляция), FASL с генотипом GC полиморфизма G(-634)C гена VEGF (достоверная положительная корреляция) и с генотипом GG полиморфизма О(-308)Агена TNF- «(достоверная отрицательная корреляция). 6. Применение нового метода терапии больным нерубцовой формой алопеции, основанного на внутридермальном введении плазмы, обогащенной тромбоцитами, полученной центрифугированием без антикоагулянта и активированной фибрином с низкомолекулярной гиалуроновой кислотой на фоне традиционной терапии, увеличила положительную динамику на 40,6%, а при введении плазмы, обогащенной тромбоцитами при помощи центрифугирования с антикоагулянтом - на 36,1% по сравнению с пациентами, получавших традиционную терапию. 7. Применение разработанного мезотерапевтического введения плазмы, обогащенной тромбоцитами, активированной фибрином и низкомолекулярной гиалуроновой кислотой у больных нерубцовой формой алопеции в виде монотерапии оказалась эффективной лишь при терапии ограниченных форм нерубцовой алопеции (очаговой и полиочаговой формах гнездной алопеции, при I-III стадиях адрогенной алопеции улиц мужского пола и I стадии - у лиц женского пола).