Молекулярно-генетические аспекты патогенеза и их роль в прогнозировании течения хронической HCV-инфекции в узбекской популяции

Аннотация

Актуальность и востребованность темы диссертации. Заболеваемость вирусным гепатитом в мире растет с каждым днем. Согласно данным ВОЗ, в настоящее время, в мире насчитывается более 170 млн. больных хроническим вирусным гепатитом С (ХВГС). В структуре хронических заболеваний печени вирусный гепатит С занимает лидирующее положение. 11аиболее высокая зараженность отмечается в странах Восточной Европы, Азии, Африки, Южной Америки. Инфицироваиность данным заболеванием в Узбекистане составляет 6,2%’. Широкая распространенность HCV-инфекции, высокая частота развития хронических форм заболевания, отсутствие специфической профилактики обусловливают необходимость более глубокого и детального изучения патогенеза заболевания. Одним из наиболее перспективных направлений в современной молекулярной патофизиологии является поиск полиморфных генов-маркеров и выявление их ассоциации в развитии заболеваний. Ограниченность данных по узбекской популяции определили актуальность и необходимость проведения работы по выявлению аллельных вариантов генов-кандидатов, ассоциированных с особенностями течения, и прогнозу заболеваемости хроническим вирусным гепатитом С в Узбекистане. В мире проводится целый ряд научных исследований, направленных на изучение особенностей патогенеза HCV-инфекции и их роли в прогнозировании течения среди различных слоев населения с целью достижения высокой эффективности диагностики и профилактических мероприятий; изучение роли и значения молекулярно-генетических особенностей патогенеза хронической HCV-инфекции в популяции; обоснование ответных реакций организма на хроническую HCV- инфекцию при прогнозировании течения заболевания; определение механизмов влияния внешних факторов на изменение пролиферации, апоптоза, функциональной активности; оценку встречаемости генов TNF-a, CTLA-4, а также CYP1A2, CYP2E1, CYP2C9*2, CYP2C9*3, CYP3A4 цитохрома Р450 при хроническом вирусном гепатите С и циррозе печени и обоснованию их связи с биохимическими маркерами у пациентов с хроническим гепатитом и циррозом печени; разработку методов идентификации, ассоциированных с генетическим полиморфизмом при хроническом гепатите; изучение патогенетических аспектов хронического гепатита С и цирроза цирроза и значения полиморфизма генов цитохрома Р450 в их механизме; прогрессирования воспалительного процесса и межгенных взаимосвязей у пациентов с хроническим гепатитом С и циррозом печени. Тщательное изучение общих и специфических особенностей молекулярных механизмов хронического гепатита позволяет осуществить разработку объективных критериев оценки активности ферментов пролиферативной и антиоксидантной систем в развитии хронического гепатита; усовершенствовать методы консервативного лечения хронического гепатита; включить в комплексное лечение хронического гепатита иммунокорректоры широкого спектра; оптимизировать тактику лечения, направленного на уменьшение осложнений и повышение эффективности лечения у пациентов с хроническим гепатитом, что имеет важное практическое значение. На сегодня решён ряд важных задач по предотвращению хронического гепатита в области медицинской практики. В целях уменьшения частоты и профилактики гепатитов Л и В были разработаны и внедрены вакцины, что привело к повышению эффективности диагностики и лечения больных хроническим гепатитом и циррозом печени. Клиническая практика показала, что в результате применения современных методов раннего выявления, диагностики и лечения хронического гепатита и цирроза печени осложнения заболевания были снижены с 25% до 12%. В этой связи, стратегия пяти приоритетов развития Республики Узбекистан на 2017-2021 годы, направленная на «... повышение качества оказания медицинской помощи на новый уровень, в том числе за счет расширения использования современных технологий в диагностике и лечении инфекционного гепатита различной степени»2 имеет решающее значение для улучшения качества жизни среди различных слоев населения. Результаты данной диссертационной работы в определенной степени послужат выполнению задач, обозначенных в Стратегическом плане действий по пяти приоритетным направлениям развития Республики Узбекистан на 2017-2021 гг., Указе Президента Республики Узбекистан от 28 ноября 2011 г. № ПП-1652 «О мерах по дальнейшему реформированию системы здравоохранения», PQ-3071 от 20 июня 2017 г. «О мерах по дальнейшему развитию специализированной медицинской помощи населению Республики Узбекистан» и другим нормативным и правовым актам, касающимся этой деятельности. Цель исследования: оценка молекулярных механизмов клинического течения хронического вирусного гепатита С с учетом прогностической значимости полиморфизма цитокинов и генов, ответственных за систему биотрансформации ксенобиотиков, у представителей узбекской популяции. Научная новизна исследования заключается в следующем: впервые проведено комплексное исследование генетического полиморфизма 308G>A TNF-a. 49A>G CTLA-4. а также 164A>C CYP1A2, 1295OC CYP2E1, 430OT CYP2C9*2, 1075A>C CYP2C9*3 и 392A>G CYP3A4 цитохрома P450 у больных хроническим гепатитом С и циррозом печени в Узбекистане и выявлена их роль в патогенезе заболевания; впервые проведен анализ распределения аллелей и генотипов цитокинов и изоферментов цитохрома Р450 при ХВГС у лиц узбекской национальности и показаны характерные отличия по сравнению со здоровыми лицами; впервые проанализирована взаимосвязь полиморфизма изучаемых генов с показателями синдромов цитолиза, холестаза и мезенхимального воспаления, характеризующими тяжесть течения хронического гепатита С. впервые показана ассоциация полиморфных вариантов цитокинов и генов, ответственных за биотрансформацию ксенобиотиков с прогрессированием ХВГС в цирроз печени, что может быть использовано в разработке прогностических критериев для выделения группы риска инфицированных лиц к прогрессированию течения ХВГС. Определение генетического профиля, позволяющее прогнозировать течение ХВГС и оценить риск формирования цирроза печени, имеет важное значение для выбора тактики ведения больных. Выявленные ассоциации расширяют понимание патогенетических механизмов ХВГС. Заключение На основе исследований по докторской диссертации на тему «Молекулярно-генетические аспекты патогенеза и их роль в прогнозировании течения хронической HCV-инфекции в узбекской популяции» представлены следующие выводы: 1. Выявлены популяционные особенности распределения аллелей и генотипов полиморфизмов TNF-a, CTLA-4, а также CYP1A2, CYP2E1, CYP2C9 и CYP3A4 цитохрома Р450 у лиц узбекской национальности, которые пополнят базу данных генофонда Узбекистана. При ХВГС умеренной степени активности наибольший уровень полиморфизма характерен для TNF-a, CTLA-4, CYP2C9 и CYP3A4, при ХВГС выраженной степени активности наибольшая частота полиморфизма отмечалась у мутантного аллеля CYP2E1, а при циррозе печени - CYP1A2, которые могут служить маркерами, характеризующими патогенез и течение заболевания. 2. Наиболее выраженные изменения показателей функционального состояния печени отмечались у носителей 1в генотипа вируса, который доминировал у больных ХВГС умереной степени активности. У больных ХВГС выраженной степени преобладал За генотип вируса, который характеризовался высокими значениями показателей цитолитического и холестатического синдромов. 3. При ХВГС умеренной степени ген-кандидат TNF-a (А/А) ассоциировался с высокими значениями показателей цитолиза и холестаза, что свидетельствует о роли данного полиморфизма в патогенезе заболевания. 4. Высокая чувствительность гена CTLA-4 и частота межгенного сочетания CTLA-4+CYP2C9*2, CTLA-4+CYP2E1, CTLA-4+CYP1А2 при ХВГС умеренной степени могут быть использованы в качестве прогностического критерия стратификации пациентов на группы с высоким и низким риском прогрессирования заболевания. 5. Прогностическим фактором развития ХВГС выраженной степени может служить мутантный аллель и генотип G/G изофермента CYP2E1, носительство которого может быть обусловлено высоким метаболизмом токсинов и ксенобиотиков, усилением оксидативного стресса и прогрессированием патологического процесса. 6. Выявлена отрицательная коррелляционная взаимосвязь (р<0,05) показателей функционального состояния печени с полиморфизмом CYP2E1 (G/G) и СУР1А2 (С/С) у больных циррозом печени, ассоциированного вирусом С, что свидетельствует о роли данного полиморфизма в стимуляции воспаления и фиброзообразования в печени.