Биологическая активность белкового препарата из сои в лечении онкологических заболеваний

Аннотация

Актуальность и востребованность темы диссертации. На сегодняшний день в мире профилактика и лечение онкологических заболеваний остается актуальной, в связи с этим создаются новые лекарственные средства биологического происхождения, получаемые из растительного и животного сырья. По статистическим данным Всемирной Организации Здравоохранения в течение 20 лет онкологическая заболеваемость возростет в два раза1. С приобретением независимости Республики организация научно-исследовательских работ по получению лекарственных средств из местного сырья и проведенные расширенные мероприятия по обеспечению национального фармацевтического рынка качественными лекарственными средствами на высоком уровне привели к определенным результатам. При этом, особенно важно отметить лекарственные препараты получаемые из местного сырья используемые при лечении онкологических заболеваний. В настоящее время механизмы этиологии и патогенеза раковых заболеваний окончательно не выяснены из-за большой сложности и многообразия молекулярных механизмов, происходящих при этом процессов. Проводимые исследования показывают, что компоненты сои способны ингибировать пролиферацию опухолевых клеток, индуцировать апоптоз в трансформированных клетках, и действуют они на опухолевые клетки, и токсические эффекты в отношении нормальных тканей организма минимальны, кроме того, одной из важнейших задач является создание эффективных лекарственных средств и внедрение их в производство. Данное диссертационное исследование в определенной степени служит выполнению задач, предусмотренных в Постановлениях Президента Республики Узбекистан от 28 ноября 2011 года № ПП-1652 «О мерах по дальнейшему углублению реформирования системы здравоохранения», Кабинета Министров Республики Узбекистан от 29 марта 2012 г.№ 91 «О мерах по дальнейшему укреплению материально-технической базы и совершенствованию организации деятельности медицинских учреждений», а также в других нормативно-правовых документах, принятых в данной сфере. Целью исследования является выделение белкового комплекса из сои, его физико-химические, фармако-токсикологические характеристики, определение противораковой активности на различных видах раковой опухоли in vivo, на биопсийном материале in vitro рака молочной железы, эндометрия и толстого кишечника. Научная новизна диссертационного исследования заключается в следующем: из бобов сои выделен белковый комплекс, определены его физико-химические, фармакологические и токсикологические свойства; доказано, что белок состоит из комплекса полипептидов с молекулярной массой 12,7-79,0 кДа, изоэлектрической точкой в области р! -4,1; 4,2;4,5 и 4,7; методом масс-спетрометрии показано наличие в белковом комплексе ингибиторы протеаз Кунитца. показана специфическая противоопухолевая активность белкового комплекса в условиях in vitro и in vivo; на основе комплекса полипептидов из бобов сои разработана лекарственная форма препарата «Биокор-0,2г» в виде таблетки. Выводы 1. Впервые из бобов сои сорта Генетик-{(Glycine max) выделена субстанция препарата «Биокор-0,2г» состоящая из комплекса белков с молекулярной массой 12,7-79,0 кДа, изоэлектрической точкой в области р! -4,1, 4,2, 4,5 и 4,7.2., определены белки входящие в состав препарата Исследование кумуляции субстанции «Биокор-0,2г» (Kunitz trypsin proteasein hibitor, beta-amylase, bcta-conglycininalphaprimesubunit, 2,4-Dinducible glutathioncS-transferase, PRIO-likcprotein, 24 kD aprotcinSC24). 2. Показана ингибирующая активность препарата «Биокор-0,2г» к сериновым протеазам трипсину, химотрипсину и плазмину. 3. Установлена противоопухолевая активность препарата «Биокор-0,2г» на перевиваемых опухолевых штаммах АКАТОЛ, АКАТОН, Меланома В-16 и Саркома 180, при монотерапии тормозит рост раковой ткани на перевиваемых опухолевых штаммах более чем на 70%. 4. Выявлено, что субстанция препарата «Биокор-0,2г» увеличивает пролиферацию клеток красного костного мозга экспериментальных животных и продолжительность жизни экспериментальных животных от 30 до 49% в зависимости от гистогенезиса опухоли. 5. Показано, что введение субстанции препарата «Биокор-0,2г» в комплексной терапии с 5-фторурацилом усиливает противоопухолевое воздействие в среднем от 10 до 25% и позволяет повысить эффективность лучевой терапии экспериментальных опухолей животных в среднем в 1,5-2,3 раза. Увеличивает выживаемость подопытных животных от 30 до 60%. 6. Установлено, что субстанция препарата «Биокор-0,2г» способствует восстановлению иммунного статуса животных-опухоленосителей, получавших 5-фторурацил, модулирует лечебное действие противоопухолевых препаратов и регулирует иммунитет у животных-опухоленосителей. 7. Определено, что введение субстанции препарата «Биокор-0,2г» способствует улучшению гематологических и морфологических показателей крови (нормализации процентного содержания лейкоцитов, повышения уровня гранулоцитов, содержания гемоглобина и числа эритроцитов). 8. Показано, что субстанция «Биокор-0,2г» ингибирует пролиферацию in vitro более чем на 50% резистентных к терапии клеток рака молочной железы с отсутствием рецепторов к эстрогенам и прогестерону, рака эндометрия, рака толстого кишечника (с высоким содержанием bcl-2 , Ki-67) на всех стадиях злокачественной трансформации. 9. Установлено, что субстанция препарата «Биокор-0,2г» относится к V классу практически нетоксичных соединений. LD50 при пероральном введении более 5000мг/кг, не обладает кумулятивным действием, не оказывает токсического действия на функцию почек и печени, а также на патоморфологию органов и тканей животных, не влияет на сердечнососудистую систему, дыхание и периферическую нервные системы. Субстанция препарат «Биокор-0,2г» не оказывает местного раздражающего, резорбтивного, аллергенного, эмбриотоксического и тератогенного, мутагенного действия, иммунотоксического действия на клеточность и вес лимфоидных органов, количество макрофагов и клеточность костного мозга. 10. Разработана лекарственная форма препарата иммуномодулятора «Биокор - 0,2г» таблетки и рекомендована для комплексного лечения онкологических заболеваний.