Оценка эффективности фитоэкдистероидов на иммуногенез в норме и при различных патологических состояниях в эксперименте

Аннотация

Актуальность и востребованность темы диссертации. В последние годы во всем мире создание лекарственных средств на основе новых соединений, полученные из растений составляет 50-60%. Среди них особое внимание уделяется средствам, обладающим иммуностимулирующим действием. В практическом здравоохранении во многих странах мира лекарственным препаратам, стимулирующие иммунологические процессы уделяется самое серьёзное внимание. Фитоэкдистероиды, как иммунотропные средства, всё более широко применяются в клинической и спортивно-медицинской практике, поскольку многие болезни и спортивные нагрузки сопровождаются нарушениями иммунной системы и могут привести к развитию вторичных иммунодефицитных состояний. В Республике со дня провозглашения независимости получены значимые результаты по развитию и совершенствованию фармакологической промышленности, проводятся широкомасштабные научно-исследовательские работы и мероприятия по пополнению рынка качественными лекарственными средствами из местного сырья. При этом предпочтение отдается таким средствам, которые помимо иммунотропных свойств, проявляют способность позитивно влиять на другие отклонения в состоянии здоровья. В настоящее время во всем мире проводятся работы по синтезу биологически активных средств и на их основе создание лекарственных препаратов с различными механизмами действия, влияющие на заболевания иммунной системы, являющиеся одной из приоритетных направлений. Одной из актуальной проблем, наряду с широко известными иммуномодулирующими средствами синтетического происхождения (левамизол, полиоксидоний) препаратов пептидной природы, получаемых из вилочковой железы крупного рогатого скота (тактивин, тимоптин, вилозен), и из культуры клеток костного мозга животных (миелопид) и других, начали получать препараты (хотя пока и немногочисленные) растительного происхождения, обладающие, достаточно высокой иммуностимулирующей активностью и многогранным протективным воздействием на организм. На основе фитоэкдистероидов создание препаратов для профилактики и лечения изменений иммунной системы, вторичных иммунодифицитных и различных патологических состояний, определение фармакологических особенностей, а также изучение механизмов действия определяют актуальность и востребованность данной работы. Данное диссертационное исследование в определенной степени служит выполнению задач, предусмотренных в постановлениях Президента Республики Узбекистан ПП-1652 от 28 ноября 2011 года «О мерах по дальнейшему углублению реформирования системы здравоохранения» и ПП-2595 от 16 сентября 2016 года «О программе мер по дальнейшему развитию фармацевтической промышленности на 2016-2020 годы», а также в других нормативно-правовых документах, принятых в данной сфере. Целью исследования является экспериментальная оценка фитоэкдистероидов, выделенных из местного растительного сырья, в качестве иммуномодулирующих средств в норме и при вторичных иммунодефицитных состояниях, обоснование целесообразности их практического применения. Научная новизна исследования заключается в следующем: впервые обосновано, фитоэкдистероиды в качестве иммуномодулирующих и иммуностимулирующих средств, а также выявлена взаимосвязь химической структуры и иммунотропного действия; определено, экдистерон и туркестерон, а также в суммарных экдистероид-содержащие препаратқ из Silene viridiflora, Silene brahuica и Ajuga turkestanica стимулируют иммунные процессы в организме животных; выявлено, фитоэкдистероиды отменяют феномен конкуренцию антигенов в иммунном ответе, стимулируют пролиферацию кроветворных стволовых клеток, стимулируют митотическую активность клеток тимуса; установлено увеличение общего количества клеток в центральных и периферических органах иммунитета, стимуляция эритро- и лейкопоэза у интактных животных и при вторичных иммунодефицитах: иммобилизация, физическая нагрузка, токсический гепатит, лучевая болезнь и анемия; впервые доказана взаимосвязь иммунотропного и фармакокоррегирующего действия фитоэкдистероидов на функциональнометаболические показатели соответствующих пред- и патологических состояний; установлено, фитоэкдистероиды обладают белоксинтезирующей активностью, стимулируют клеточный иммунитет и реакцию фагоцитоза, являются регуляторами биохимических и физиологических процессов, протекающих при вторичных иммунодефицитах; обосновано, фитоэкдистероиды, обладают тонизирующими, белковоанаболическими свойствами, способны корригировать нарушения в иммунной системы при вторичных иммунодефицитах и являются полифункциональными средствами. ЗАКЛЮЧЕНИЕ 1. Фитоэкдистероиды (индивидуальные соединения и суммарные экдистероидсодержащие препараты) проявляют в организме млекопитающих (мыши, крысы, хомяки) и птиц (цыплята) как в норме, так и особенно при различных патологических состояниях, выраженное иммуностимулирующее действие. Под их влиянием усиливается процесс первичного антителообразования, проявляющийся увеличением в селезенке числа АОК в ответ на иммунизацию эритроцитами барана, повышается титр антител в крови, активируется фагоцитоз, возрастает клеточность центральных и периферических органов иммунитета, стимулируется эритро- и лейкопоэз, повышается пролиферативный потенциал кроветворных стволовых клеток в селезенке мышей. 2. Среди исследованных индивидуальных фитоэкдистероидов иммуностимулирующая активность возрастала в направлении: 2-дезокси-а-экдизон < а-экдизон < интегристерон А< силенеозиды А и В< экдистерон < туркестерон. Наибольшую активность проявляли суммарные экдистероидсодержащие препараты, выделенные из Silene viridiflora, Silene brahuica и особенно Ajuga turkestanica. Наиболее активные из них (экдистерон, туркестерон и суммарный экдистероидсодержащий препарат из Ajuga turkestanica) по выраженности своего иммуностимулирующего действия не уступали известным иммуномодулирующим средствам: Т-активину и иммуналу, либо даже превосходили их по активности. 3. Наиболее четкий иммуностимулирующий эффект фитоэкдистероидов отмечается при их введении в начале и разгаре продуктивной фазы, т.е. в момент наибольшей белоксинтезирующей активности плазматических клеток. Их действие может рассматриваться не только за счет увеличения числа АОК и повышенной выработки антител в ответ на антигенную стимуляцию, но и за счет включения в процесс антителообразования резервных «зрелых» антителопродуцентов. Еще одной стороной действия фитоэкдистероидов, характеризующих их в качестве значимых иммунотропных средств, является способность отменять феномен конкуренции антигенов при последовательной иммунизации животных эритроцитами лошади и эритроцитами барана. 4. Проведенный гистоморфологический анализ ткани центрального органа иммунитета у мышей после введения им фитоэкдистероидов (рассмотрено на примере экдистерона) показал, что в этом случае наблюдается значительное увеличение пролиферации клеток тимуса, при этом индекс пролиферации (отношение апоптотического индекса к митотическому) показывает высокую скорость обновления тимических эпителиоцитов и тимоцитов в этом органе, сохраняет в нем микроциркуляцию, вызывает активацию органоспецифических пулов резидентных макрофагов. 5. При стрессорном воздействии на организм животных (длительная иммобилизация в неудобной позе, плавание до предела) под действием фитоэкдистероидов (их суммарных препаратов) отмечается не только восстановление резко сниженных показателей состояния иммунитета, но и заметное повышение его адаптационных возможностей, приводящее к купированию явлений утомления, повышению переносимых физических нагрузок, ускорению процессов восстановления, в основе чего лежит оптимизация протекания биохимических реакций в организме, направленных на поддержание гомеостаза энергопродукции. 6. Введение фитоэкдистероидов животным с вторичным иммунодефицитом, развивающимся на фоне ССЦ-гепатита проявляет явную тенденцию к восстановлению иммунного статуса организма, оказывает выраженное гепатозащитное действие: устраняет явления гипопротеинемии, синдром цитолиза гепатоцитов и холестаз, нормализует пигментный обмен, восстанавливает гликогенсинтезирующую функцию печени, ингибирует процессы перекисного окисления липидов, улучшает процесс секреции желчи и ее химический состав. 7. Фитоэкдистероиды достаточно эффективно восстанавливают резко угнетенные при лучевой болезни животных функциональные показатели и количественные характеристики, определяющие их иммунный статус, увеличивают выживаемость и продолжительность жизни после тотального облучения, ускоряют постлучевое восстановление эритро- и лейкопоэза, способствуют репопуляции клеток тимуса, костного мозга, селезенки и лимфатических узлов. 8. Фитоэкдистероиды в условиях токсической анемии, вызванной фенилгидразином, сопровождающейся снижением иммунологической реактивности организма, заметно уменьшают выраженность изменений иммунологических функций (повышают число АОК в селезенке и титр антител в крови, способствуют нормализации содержания клеток в тимусе, костном мозге, селезенке и лимфатических узлах), стимулируют гемопоэз. 9. Фитоэкдистероиды (суммарные экдистероидсодержащие препараты), как иммуноактивные средства, обладающие к тому же протективным эффектом на организм и не проявляющие токсических эффектов, представляют значительный интерес в качестве перспективных, чрезвычайно эффективных иммуномодулирующих средств.