Результаты испытания отечественных наборов ифа для диагностики бруцеллёза животных

Аннотация

В статье приведены материалы по испытанию отечественного набора ИФА- «Бруцеллез IgG-ИФА» предназначенного для диагностики бруцеллёза животных. Результаты предварительных исследований указывают на высокую их специфичность и активность по сравнению с традиционным классическим методом РА предназначенного для скрининговой диагностики. Ключевые слова: Бруцеллёз, антиген, антитела, иммуноферментный анализ, коньюгат, стоп-реагент. Введение. Бруцеллез - особо опасное зоонозное заболевание, склонную к переходу в хроническую форму и широко распространенное среди животных и людей. С момента открытия возбудителя прошло уже более 135 лет. Однако, несмотря на то, что это заболевание хорошо изучено многими отечественными и зарубежными исследователями, проблема бруцеллеза остается актуальной и посей день во многих странах мира. В экономически развитых странах, таких как США, Франция, Германия, Дания, Норвегия, Швеция, Финляндия, Швейцария и др. достигнуты определенные успехи в борьбе с бруцеллезом крупного рогатого скота, вызванной видом Brucella abortus. Иначе обстоит дело с бруцеллезом мелкого рогатого скота, вызываемого видом Brucella melitensis, эпизоотическая и эпидемическая ситуация по которым ухудшается. Так, в южной полосе Европы и примыкающих к бассейну Средиземноморья (Юго-восточная Франция, Португалия, Испания, Греция, Италия, Турция, Сицилия, Мальта, Крит и др.) эпидемический бруцеллёз достаточно широко распространен среди людей и связанно это в первую очередь с поражённостью бруцеллёзом коз и овец и широким употреблением молочной продукции в частности сыров и брынзы [1, 2, 3, 4, 5]. В странах СНГ: России, Азербайджане, Казахстане, Киргизии, Таджикистане, Узбекистане, Армении, Грузии, Туркмении и др., заболевание бруцеллёз, также является одной из наиболее актуальных проблем. В частности, в настоящее время эпизоотическая и эпидемиологическая обстановка по бруцеллезу в Узбекистане остается не совсем благоприятной и http://www.newjournal.org/ 7 3 Volume–14_Issue-2_October_2022 JOURNAL OF NEW CENTURY INNOVATIONS определяется наличием бруцеллеза в основном среди мелкого и крупного рогатого скота. Сегодня поголовье скота в Узбекистане насчитывает более 12 млн. голов крупного и примерно - 25 млн. голов мелкого рогатого скота. Одной из основных причин наличия бруцеллёза в стране заключается в том, что 94,1% крупного и 83,9% мелкого рогатого скота находится в частных подворьях дехканских хозяйств, где проведение противобруцеллёзных мероприятий и контроль за ним становится очень трудоёмким и затратным. Другой немаловажной причиной является то, что не изученными остаются вопросы эпизоотологии бруцеллёза лошадей, свиней, верблюдов и др. видов животных, которые также могут служить источником данной инфекции и их роль в распространении бруцеллёза имеет существенное значение. Известно, что первостепенными, в борьбе с бруцеллёзом являются контроль и специфическая профилактика. Задачей контроля и специфической профилактики бруцеллёза является искусственное снижение степени заболеваемости животных до относительно низкого уровня при его возникновении или распространении внутри указанного района. А это решение социальных и экономических вопросов, т.е. исключение его влияния на здоровье людей и торговлю животноводческой продукцией. Для проведения своевременного контроля необходимо наличие компетентных лабораторий, специалистов и достаточного количества в первую очередь диагностических средств. Поэтому одной из основных задач, стоящих перед ветеринарной наукой и исследователями, является разработка и внедрение новых инновационных биотехнологических приёмов, направленных на производство высокоэффективных диагностикумов. Одним из эффективных и достоверных методов при диагностики инфекционных болезней является иммуноферментный анализ (ELISA). Целью наших научных исследований являлось испытание впервые разработанных в Узбекистане отечественных наборов, предназначенных для иммуноферментного анализа и используемых для диагностики бруцеллёза животных. Материалы и методы Разработка реагентов для иммуноферментного анализа (ИФА) - «Набор реагентов для иммуноферментного выявления IgG антител к возбудителю бруцеллеза в сыворотке (плазме) крови крупного рогатого скота» (далее «Бруцеллез IgG-ИФА») проводилась совместно со специалистами СП ООО «UNIGEN» и Российской компанией «ХЕМА» на базе Научно- исследовательского института ветеринарии. http://www.newjournal.org/ 7 4 Volume–14_Issue-2_October_2022 JOURNAL OF NEW CENTURY INNOVATIONS При изготовлении наборов «Бруцеллез IgG-ИФА» использовали планшеты - 96-луночные полистироловые, стрипированные (или моноплитки), с сорбированным антигеном. В качестве отрицательного контроля, использовали сыворотку крови КРС, не содержащих антител к возбудителю бруцеллеза. Положительными контролями, служили сыворотки крови КРС, с известным содержанием IgG антител к возбудителю бруцеллеза. Также, использовали готовое к применению конъюгаты антител, конъюгированные пероксидазой хрена с красителем и субстратным раствор