К вопросу об изменении становления активности энтеральных ферментов крысят в условиях иммобилизации и пути коррекции их феназепамом

Аннотация

Несмотря на большое количество работ, на сегодняшний день все еще нет однозначного определения понятия «стресс». По мнению одного из ведущих специалистов в этой области Т.Кокса (1981), любые определения и описания стресса, существующие в настоящее время, являются недоработанными и неполными, их следует считать лишь поводом для дискуссий, а не принимать как нечто неопровержимое. Ключевые слова: стресс, транквилизатор, гомогенат, тонкая кишка, ферменты, топография, активность Все большее внимание привлекают вопросы о зависимости протекания стресс – реакции от возраста (1,2,3), пола (4), индивидуальных генетических (5,6), типологических (7), эмоциональных (8) и поведенческих особенностей организма (9). Известно, что в стрессорную реакцию организма почти всегда вовлекаются органы пищеварения. Этот вопрос достаточно хорошо изучен в онтогенетическом аспекте. Однако в доступной литературе мы не нашли данных о состоянии пищеварительной системы в норме и при стрессах у взрослых животных, отличающихся между собой поведенческими характеристиками, например, по степени агрессивности, и у их потомства, а также об особенностях действия транквилизатора феназепама при стрессе у этих особей. Следует учесть, что результаты изучения агрессивного поведения животных и душевнобольных позволяют говорить о принципиальном сходстве механизмов агрессивного поведения млекопитающих. Цель работы: изучить активность и топографию энтеральных ферментов у взрослых нелинейных крыс. Материалы и методы: В эксперименте использовали белых нелинейных лабораторных крыс различного возраста. Опыты проводились на взрослых крысах-самцах массой тела 180-200 г. Использовались три группы взрослых крыс – так называемая «смешанная» группа (животные не проверялись на агрессивность), неагрессивная и агрессивная группы, в которых животные тестировались на агрессивность, связанную с болью, по методике А.Л. Рылова. 38 Иммобилизационный стресс вызывали путем принудительной иммобилизации в течение 24 часов. Феназепам вводили перорально за 30 минут до стресса в дозе 2мг/кг. В качестве контроля использовали крыс с соответствующей поведенческой характеристикой, которым перорально вводили эквивалентное количество дистиллированной воды. После 24-часового голодания крыс умертвляли путем декапитации. В гомогенате слизистой оболочки, снятой вдоль всей тонкой кишки, или снятой отдельно с двенадцатиперстной кишки, с трех равных между собой нижележащих участков, условно названных проксимальным, медиальным и дистальным (для выяснения топографии ферментативных активностей) с помощью фотоэлектроколориметрических методов определяли активности энтеральных ферментов: моноглицеридлипазы – методом А.М. Уголева и М.Ю. Черняховской; глицин – 1-лейциндипептидгидролазы-методом А.М. Уголева и Н.М. Тимофеевой; амилазы – методом Smyth a. Roe в модификации А.М. Уголева; сахаразы – методом Nelson в модификации А.М.Уголева; лактазы – методом Dahlquist. Активность ферментов рассчитывали на единицу массы сырой ткани слизистой оболочки тонкой кишки и выражали в мг/мин/г для амилазы и мкмоль/мин/г для остальных ферментов. Адгезия энтероцитов измерялась методом А.Г. Меликянц и соавт. Во всех опытах измерялись масса тела крыс, масса слизистой оболочки по участкам тонкой кишки, длина и диаметр кишки. Визуально с помощью лупы определялось наличие язв, эрозий или кровоизлияний в слизистой оболочке; их количество рассчитывалось на 1см2 ее поверхности. Статистическую обработку полученных результатов проводили методом Стьюдента и Фишера с вычислением средних арифметических величин М, их стандартных ошибок m, показателей достоверности различий сравниваем величин t и P. Величину Р≤0,05 рассматривали как показатель достоверных различий. В зависимости от поведенческих особенностей животных, имеются вариации в активности и топографии ферментов и адгезии энтероцитов на протяжении всей тонкой кишки. Эти параметры близки между собой у крыс из смешанной и неагрессивной группы, у агрессивных же особей отмечается картина, резко отличная от двух вышеописанных групп: масса слизистой оболочки по участкам тонкой кишки у них больше, активность энтеральных ферментов, кроме лактазы, в гомогенате слизистой оболочки, снятой вдоль всей тонкой кишки, выше; топография ферментов иная, адгезия энтероцитов ниже. Активность ферментов в гомогетате слизистой оболочки, снятой вдоль всей тонкой кишки, у взрослых крыс из смешанной, неагрессивной и агрессивной группы (М±m, n=6) 39 Таблица 1 Группа крыс Фермент Смешанная Неагрессивная Агрессивная Моноглице 5,8±0,3 9,6±0,3 ридлипаза 5,8±0,2 Р≥0,1 Р≤0,01 (мкмоль//мин/г) Дипептид 12,0±1,1 19,7±0,9 гидролаза 10,9±0,2 Р≥0,05 Р≤0,01 (мкмоль/мин/г/) Амилаза 208,1±7,4 307,3±6,4 204,6±7,8 (мг/мин/г) Р≥0,1 Р≤0,05 Сахараза 15,2±0,6 32,1±0,7 14,0±0,6 (мкмоль/мин/г) Р≥0,05 Р≤0,01 Лактаза 0,49±0,04 0,44±0,04 О,42±0,03 (мкмоль/мин/г) Р≥0,05 Р≥0,1 Иммобилизационный стресс по-разному влияет на функциональные показатели тонкой кишки в зависимости от поведенческих особенностей у взрослых крыс. Эти изменени